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關(guān)于ATCC的細胞 ,你需要知道的那些事兒

更新時間:2020-01-08      點擊次數(shù):2665
   關(guān)于ATCC的細胞 ,你需要知道的那些事兒
  ATCC以生命科學領(lǐng)域*知識的獲取,分類,匯總,完善進而廣泛傳播為己任,以期為推動生物原料,生物信息,生物技術(shù),知識產(chǎn)權(quán),規(guī)范等相關(guān)領(lǐng)域的前沿性、合法化、實用性發(fā)揮一定的作用。
  ATCC擁有目前zui大的、品種zui豐富的微生物、細胞系以及重組DNA原料,同時它也是科研工作者*的提供可靠的研究材料的供應(yīng)商。
  ATCC的成立可追溯到1925年,一個科學委員會認識到科學研究對于微生物的大量需求而萌發(fā)了創(chuàng)建一個微生物相關(guān)制品供應(yīng)中心的想法。
  而今,ATCC已經(jīng)發(fā)展成了一個性的非營利性的生物資源中心,向遍布的企業(yè)、政府以及科研機構(gòu)提供生物制品、技術(shù)支持和培訓教程。
  細胞模型是促進我們對細胞生物學、分子信號通路的認識、以及發(fā)現(xiàn)新的治療方法的一個重要工具。對基因異常引起疾病的病因?qū)W研究,以及對潛在治療方法的評估,通常都是通過相關(guān)的體外模型來完成的。
  復(fù)蘇程序:
  1、準備細胞培養(yǎng)容器(如T-75細胞瓶),加入至少10 ml適當?shù)呐囵B(yǎng)基,并平衡溫度及pH。
  2、從液氮罐中取出凍存管,并在37℃(或適合該細胞的溫度)水浴中緩慢搖動至冰晶*融化(約2 min),注意解凍過程要迅速。
  3、從水浴中取出凍存管,浸泡或者噴撒酒精消毒。后續(xù)的操作,需在無菌操作臺中,并保證嚴格無菌。
  4、擰開凍存管蓋,將細胞懸液轉(zhuǎn)移至含有9ml*培養(yǎng)基的無菌離心管中。溫和離心(125g×10min),棄去上清去除凍存保護劑。注意不要擾動細胞層。加入1-2 ml*培養(yǎng)基重懸細胞,緩慢吹打使細胞團變松散。將細胞懸液轉(zhuǎn)移至含培養(yǎng)基的容器中充分混合。
  5、24小時后,檢測細胞狀態(tài)。
  注:細胞復(fù)蘇時,應(yīng)以zui快速度融化凍存的細胞溶液,然后迅速與*培養(yǎng)基混合,并接種到合適的細胞瓶中。
  單層貼壁細胞:
  為了保證單層貼壁細胞的對數(shù)生長,需要定期傳代。當細胞生長接近指數(shù)生長后期(匯合率大約70%到90%),準備傳代。針對傳代過程,ATCC提供的產(chǎn)品說明中,會推薦細胞傳代分配比例和補充培養(yǎng)基策略。
  單層貼壁細胞傳代,需要打斷細胞之間的連接。對于比較松散的連接,猛擊培養(yǎng)瓶側(cè)壁,可以分離細胞。很多情況下,需要胰蛋白酶/EDTA的蛋白水解酶來消化。對于一些細胞系,需要采用刮等機械方法分離細胞。細胞分離成為單細胞懸液后,稀釋到適當?shù)拿芏炔⑥D(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中,在適當?shù)纳L培養(yǎng)基中,細胞將再貼壁生長和分裂。
  由于每種細胞都是*的,孵化時間和溫度、清洗次數(shù)或溶液配方可能會有所不同。分離過程中,應(yīng)用顯微鏡密切觀察細胞,以防止細胞損傷。這個過程根據(jù)容器使用合適的培養(yǎng)體積。
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