精品国产乱码一区,欧美自拍网站一二,亚洲AV熟女传媒一区二区三区,亚洲在线麻豆

咨詢熱線

15000266580

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  病毒載體構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株有什么優(yōu)勢(shì)?

病毒載體構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株有什么優(yōu)勢(shì)?

更新時(shí)間:2018-10-27      點(diǎn)擊次數(shù):2071
  病毒載體構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株有什么優(yōu)勢(shì)?
  化學(xué)試劑介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法和電轉(zhuǎn),整合率低,同時(shí)整合位點(diǎn)不穩(wěn)定,易發(fā)生再次丟失的情況,而且整合位點(diǎn)一般都在轉(zhuǎn)錄活躍區(qū)之外,所以并不是理想的穩(wěn)定整合工具。另外,整合后的拷貝數(shù)是由核內(nèi)的外源DNA局部濃度,而不是轉(zhuǎn)染時(shí)的DNA的量決定,而化學(xué)方法在輸入質(zhì)粒載體入核的效率比電轉(zhuǎn)和病毒載體相比要低得多,導(dǎo)致其轉(zhuǎn)染相同細(xì)胞所用質(zhì)粒載體用量要大大高于其它方法,造成入核質(zhì)粒載體量難以控制,這也解釋了為什么化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和其它兩種方比,更傾向于得到串聯(lián)多拷貝。以上種種因素,導(dǎo)致使用非病毒載體轉(zhuǎn)染方法構(gòu)建穩(wěn)定株,成功率低,穩(wěn)定性差,穩(wěn)定克隆株易出現(xiàn)不均一(含有非整合細(xì)胞)等缺點(diǎn)。
  逆轉(zhuǎn)錄病毒載體由于整合率高,是非常理想的穩(wěn)定株構(gòu)建工具。而且通過控制逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)條件,理論上可以確保每個(gè)細(xì)胞只有單拷貝插入。同時(shí)由于病毒載體是通過病毒重組酶將外源片段整合入染色體中,其整合特性和病毒自身整合特性非常相似:偏向于轉(zhuǎn)錄活躍區(qū)段,且整合后非常穩(wěn)定,在傳代100次后仍然保留在宿主基因組中。重要的是整合幾率和所有其它化學(xué),物理轉(zhuǎn)染方法比,增加5至6個(gè)數(shù)量,使得穩(wěn)定株構(gòu)建不再成為實(shí)驗(yàn)研究的障礙。由于整合幾率非常高,所以很容易獲得混合穩(wěn)定株。
  腺病毒載體整合率和普通轉(zhuǎn)染方法差異不大,被認(rèn)為是不能整合的一類病毒載體,因此相關(guān)研究數(shù)據(jù)較少,不建議用來構(gòu)建穩(wěn)定株。非野生型腺相關(guān)病毒載體(Rep-)整合率較低,但因?yàn)橐吧筒《据d體可以定點(diǎn)將病毒基因組整合于人19號(hào)染色體,所以從安全性和穩(wěn)定性角度來說,潛力都非常巨大。由于諸多因素,研究人員仍然在對(duì)其進(jìn)行改造中,包括考慮到嚙齒類動(dòng)物不含有人19號(hào)染色體對(duì)應(yīng)的整合位點(diǎn)序列。
聯(lián)系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區(qū)四平路710號(hào)7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2025 上海復(fù)祥生物科技有限公司 All Right Reserved    備案號(hào):滬ICP備10013034號(hào)-2     sitemap.xml
技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸
5252aⅴhaose我爱久久| 国产一卡2卡3卡4卡新区视频| 日韩a级视频| 精品久久综合1区2区3区激情| 久久久精品午夜免费不卡| 黄网在线观看免费网站| 五月综合网亚洲乱妇久久| 久久男人av久久久久久男| 欧洲精品久久久久毛片完整版| 欧美h视频| 亚洲色图欧美| 亚洲国产中文在线精品国自产拍愿五月 | 91精品久久久久久| 777米奇色狠狠8888影视| 99精品国产高清一区二区| 国产aⅴ无码专区亚洲av麻豆| 宝贝乖把腿张开让你爽动态图| 和公在野外好爽好hhh视频| 日日弄天天弄美女bbbb| 91中文字幕在线| 亚洲一区二区女搞男| 亚洲AⅤ无码一区二区波多野在线| 人人做人人爽人人爱| 亚洲中文字幕精品久久久久久动漫| 中国精品偷拍区偷拍无码| 亚洲熟女少妇一区二区| 丹江口市| 故城县| 久久久久久久久久久国产| 四虎永久免费| 日韩成人综合| 久久国产v一级毛多内射| 欧美日韩精品一区二区在线观看| 精品人妻大屁股白浆无码| 在线观看激情无码成人AV| 无码中文字幕乱码| 在线成人一区二区| 亚洲国产欧美在线观看| 少妇无码AV无码专区在线观看| 在线观看一区二区三区av| 亚洲熟伦熟女新五十路熟妇|