精品国产乱码一区,欧美自拍网站一二,亚洲AV熟女传媒一区二区三区,亚洲在线麻豆

咨詢熱線

15000266580

當(dāng)前位置:首頁  >  技術(shù)文章  >  細(xì)胞培養(yǎng)的成功因素之一細(xì)胞消化

細(xì)胞培養(yǎng)的成功因素之一細(xì)胞消化

更新時(shí)間:2016-08-26      點(diǎn)擊次數(shù):3298

1. 絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤洗一遍即可。去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37℃一般不到2min足夠消化細(xì)胞。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37℃消化。比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育。


2.細(xì)胞如何算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成*分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是*成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性。如果和標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)不一致,那可能是自己沒消化好導(dǎo)致的,但如果消化方法正確,仍然成片分布,甚至*吹打成單細(xì)胞懸液,貼壁后仍然成片分布,這是細(xì)胞的特性,是因?yàn)橘N壁過程中重新聚集了。這個(gè)時(shí)候你拼了命要去讓它均勻分布,你的細(xì)胞之后會對你越來越不好。


3.EDTA的作用。胰酶切割ECM的一些負(fù)責(zé)粘連和附著的蛋白,而EDTA通過螯合Ca離子,作用于Integrin的活性,所以EDTA的作用更加溫和。有的人在胰酶里添加一些EDTA,或者對付特別難消化的細(xì)胞,添加多一些EDTA

4.PBS洗滌。消化之前用PBS洗滌,是常見的操作,因?yàn)檠逯?/span>含有抑制胰酶的蛋白。對于一些難消化細(xì)胞,那么可以配制不含Ca,Mg離子的PBS,因?yàn)檫@些離子也會抑制胰酶的活性。但對于絕大部分胰酶或者EDTA溶液潤洗即可消化的細(xì)胞,不需要配制如此溶液。

聯(lián)系方式

郵箱:xiangfbio@163.com

地址:上海市虹口區(qū)四平路710號7層

咨詢熱線

400-821-8510

(周一至周日9:00- 19:00)

在線咨詢
  • 掃一掃 微信咨詢

Copyright©2025 上海復(fù)祥生物科技有限公司 All Right Reserved    備案號:滬ICP備10013034號-2     sitemap.xml
技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸
日日人人妻人人澡人人爽欧美| 聂荣县| 免费黄色网址大全| 亚洲va成无码人在线观看| 免费无码av片在线观看| 午夜精品一区二区三区免费视频| free性饿老太xxhd| 97成人在线| 97SE狠狠狠狠狼鲁亚洲综合色| 亚洲av永久无码精品天堂动漫 | 久久久久亚洲av无码麻豆| 97影院| ysl蜜桃色www| 爱爱免费| 国产露脸精品产三级国产av| 天堂…中文在线最新版在线| 亚洲国产精品va在线播放| 亚洲成AV人片无码不卡| 日本边添边摸边做边爱边| 国模国产精品嫩模大尺度视频| 91精品国产91久久久久久三级 | 鲁死你av资源站| 99久久精品国产第一页| 吃奶摸下高潮60分钟免费视频| 一边做饭一边躁狂怎么办| 国产久免费热视频在线观看| 特大巨黑吊性xxxx| 99RE6在线视频精品免费下载| 亚洲av之男人的天堂网站| 99视频国产精品免费观看 | 外国大片| 中文字幕一区二区三区人妻| 国产毛片毛片| 被男友做的很爽的一次| 国产精品一区二区av| 老色批影院| 少妇免费毛片久久久久久久久 | 丰满少妇内射一区| 日韩人妻无码一区二区三区久久99 | 欧洲熟妇色xxxxx欧美老妇伦| 特级毛片aaaaaa|